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大鼠淀粉樣前體蛋白疫分析試劑盒使用說明書

2015-04-23 [1118]

大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

使用目的:

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)水平。用純化的大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1),再與HRP標記的β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)濃度。 

試劑盒組成 

1 20倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 3ml×1瓶

2 酶標試劑 3ml×1瓶 8 標準品(160U/L) 0.5ml×1瓶

3 酶標包被板 12孔×4條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶

4 樣品稀釋液 3ml×1瓶 10 說明書 1份

5 顯色劑A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2張  

6 顯色劑B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1個

標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

計算

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月

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