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細(xì)胞ERK1/2激酶試劑盒的用途和注意事項(xiàng)

2022-07-11 [1774]

細(xì)胞ERK1/2激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑盒的用途和注意事項(xiàng)

 

主要用途

 細(xì)胞ERK1/2激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過多肽底物,在ERK1/2激酶敏感性抑制劑存在與否的情況下,受到ERK1/2激酶磷酸化后,進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測(cè)定產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng), 即采用光度法測(cè)定其氧化后吸光峰值的變化,以分析細(xì)胞裂解樣品中ERK1/2激酶總活性而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、部分或*純化酶樣品中ERK1/2激酶的定量檢測(cè),以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,高度敏感。

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注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品為20次操作

2. 操作時(shí),須戴手套

3. 系統(tǒng)操作過程中,背景測(cè)定只需1次

4. 樣品處理忌用磷酸緩沖溶液 

5. 樣品須澄清,至關(guān)重要 

6. 加入樣品啟動(dòng)反應(yīng)后3秒內(nèi)即刻光度測(cè)定

7. 建議使用比色皿測(cè)定

8. 測(cè)定值由高到低變化;測(cè)定可持續(xù)30分鐘

9. 光度測(cè)定后,比色皿須清洗*

10. 樣本測(cè)定0分鐘讀數(shù)高于5分鐘讀數(shù)表明具有酶活性

11. 樣本測(cè)定讀數(shù)持續(xù)上升,表明酶活過低或樣品量過低

12. 非特異活性高于總活性,表明特異性酶活過低或樣品量過低

13. 建議待測(cè)樣本蛋白濃度為100微克/10微升(本公司提供  Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1) 

14. 如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度

15. ERK激酶活性單位濃度定義:在30℃溫度下,pH 7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作為一個(gè)活性單位

16. 本公司提供系列蛋白激酶檢測(cè)試劑產(chǎn)品


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