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血清總蛋白質(zhì)的測(cè)定方法1、凱氏定氮法仍然是建立各個(gè)具體方法時(shí)采用的參考標(biāo)準(zhǔn)方法。2、雙縮脲比色法是目前首先推薦的蛋白質(zhì)定量方法。方法操作簡(jiǎn)便，雖然雙縮脲試劑有大同不異。其中酒石酸鉀納可以穩(wěn)定在堿性溶液中的銅離子，含有碘化物作為抗氧化劑。雙縮脲反應(yīng)生成的復(fù)合物其吸收峰為540nm?？刹捎?的標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)稱量，必要時(shí)用凱氏定氮法標(biāo)定。各地質(zhì)控中心提供的混合標(biāo)準(zhǔn)血清可作為第二參考，血清用量100μl，在10-120g/L濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，批內(nèi)CV值3、染料...

液氮罐的使用與保管需注意以下幾個(gè)方面：一、使用前的檢查液氮罐在充填液氮之前，首先要檢查外殼有無(wú)凹陷，真空排氣口是否完好。若被碰壞，真空度則會(huì)降低，嚴(yán)重時(shí)進(jìn)氣不能保溫，這樣罐上部會(huì)結(jié)霜，液氮損耗大，失去繼續(xù)使用的價(jià)值。其次，檢查罐的內(nèi)部，若有異物，必須取出，以防內(nèi)膽被腐蝕。二、使用過(guò)程中的檢查使用過(guò)程中要經(jīng)常檢查?？梢杂醚塾^測(cè)也可以用手觸摸外殼，若發(fā)現(xiàn)外表掛霜，應(yīng)停止使用;特別是頸管內(nèi)壁附霜結(jié)冰時(shí)不宜用小刀去刮，以防頸管內(nèi)壁受到破壞，造成真空不良，而是應(yīng)將液氮取出，讓其自然融化...

ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。（一）原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，...

表觀遺傳改變可以定義為基因的遺傳性或獲得性改變，但是這種改變和DNA序列改變無(wú)關(guān)。DNA甲基化是zui為常見的表觀遺傳改變；啟動(dòng)子或*外顯子CpG島中的甲基化改變將導(dǎo)致基因表達(dá)失活；組蛋白的化學(xué)修飾也可以作為表觀遺傳改變；組蛋白發(fā)生乙酰化改變的基因通常被開啟。CpG島的異常甲基化是導(dǎo)致基因沉默和過(guò)度表達(dá)的zui主要的改變，常規(guī)的方法不能在全基因組水平上對(duì)甲基化進(jìn)行檢查。表觀遺傳分析與基因芯片技術(shù)結(jié)合起來(lái)則可以高通量進(jìn)行甲基化的定性、定量分析。目前建立了2種基于芯片的甲基化分析...

DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上,多次苯酚氯仿等有機(jī)溶劑抽提使蛋白質(zhì)變性沉淀于有機(jī)相,而核酸保留在水相,達(dá)到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過(guò)程中殘留的有機(jī)溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應(yīng),zui后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽(yáng)離子去污劑,能與核酸形成復(fù)合物,此復(fù)合物在高鹽（0.7mol/...

體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時(shí)，有時(shí)即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：1、從物品、用品消毒滅菌著手細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無(wú)菌才能使用。同時(shí)，在無(wú)菌過(guò)濾操作中，隨著濾過(guò)體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇zui后過(guò)濾的液體進(jìn)行檢測(cè)。定期對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養(yǎng)...